ReadyPlanet.com


ยกตัวอย่างเช่นลำดับดีเอ็นเอ


 

ยกตัวอย่างเช่นลำดับดีเอ็นเอโปรตีนที่สนใจอาจจะโคลนหรือsubclonedเป็นพลาสมิดสำเนาจำนวนมากที่มีครั่ง (มักLacUV5 ) โปรโมเตอร์แล้วจะถูกเปลี่ยนเข้าไปในแบคทีเรียE. coli การเพิ่มIPTG ( แอนะล็อกแลคโตส ) จะกระตุ้นครั่งก่อการและทำให้แบคทีเรียแสดงโปรตีนที่สนใจE. coliสายพันธุ์ BL21 และ BL21 (DE3) เป็นสองสายพันธุ์ที่นิยมใช้ในการผลิตโปรตีน ในฐานะสมาชิกของสายเลือด B พวกเขาขาดโปรตีเอสlonและOmpTซึ่งปกป้องโปรตีนที่ผลิตจากการย่อยสลาย DE3 prophage ที่พบใน BL21 (DE3) ให้T7 RNA polymerase (ขับเคลื่อนโดยตัวส่งเสริม LacUV5) ทำให้สามารถใช้เวกเตอร์ที่มีตัวส่งเสริม T7 แทนได้

ชนิดที่ไม่ก่อให้เกิดโรคใช้สำหรับการผลิตกรดอะมิโนต่างๆในเชิงพาณิชย์ ซี glutamicumชนิดถูกนำมาใช้กันอย่างแพร่หลายในการผลิตกลูตาเมตและไลซีน ส่วนประกอบของอาหารของมนุษย์, อาหารสัตว์และผลิตภัณฑ์ยาการแสดงออกของการใช้งานตามหน้าที่ของมนุษย์ปัจจัยการเจริญเติบโตที่ผิวหนังได้กระทำในซี จึงแสดงให้เห็นถึงศักยภาพในการผลิตในระดัอุตสาหกรรมของโปรตีนของมนุษย์ โปรตีนที่แสดงออกสามารถกำหนดเป้าหมายสำหรับการหลั่งผ่านทางทั่วไปทางเดินสารคัดหลั่ง (Sec) หรือเส้นทางการย้ายตำแหน่งคู่อาร์จินีนสนับสนุนโดย slotxo เว็บ สล็อตxซึ่งแตกต่างจากแบคทีเรียแกรมลบCorynebacteriumแกรมบวกไม่มีlipopolysaccharidesซึ่งทำหน้าที่เป็นเอนโดทอกซินแอนติเจนในมนุษย์Pseudomonas fluorescens แบคทีเรียที่ไม่ก่อให้เกิดโรคและแกรมลบคือPseudomonas fluorescensใช้สำหรับการผลิตโปรตีนรีคอมบิแนนต์ในระดับสูง โดยทั่วไปสำหรับการพัฒนาทางชีวภาพบำบัดและวัคซีน P. fluorescensเป็นสิ่งมีชีวิตที่สามารถเผาผลาญได้หลากหลายทำให้สามารถคัดกรองปริมาณงานที่สูงและพัฒนาโปรตีนที่ซับซ้อนได้อย่างรวดเร็ว P. fluorescens เป็นที่รู้จักกันดีมากที่สุดในเรื่องความสามารถในการผลิตโปรตีนที่ละลายน้ำได้อย่างรวดเร็วและประสบความสำเร็จ

ระบบยูคาริโอตยีสต์ระบบการแสดงออกโดยใช้S. cerevisiaeหรือPichia pastorisช่วยให้สามารถผลิตโปรตีนได้อย่างเสถียรและยั่งยืนซึ่งผ่านกระบวนการคล้ายกับเซลล์ของสัตว์เลี้ยงลูกด้วยนมโดยให้ผลผลิตสูงในอาหารที่กำหนดทางเคมีของโปรตีนเชื้อราใยเชื้อราโดยเฉพาะอย่างยิ่งAspergillusและเชื้อรา Trichodermaแต่ยังเมื่อเร็ว ๆได้รับการพัฒนาเป็นแพลตฟอร์มการแสดงออกสำหรับการคัดกรองและการผลิตที่มีความหลากหลายเอนไซม์อุตสาหกรรม ระบบการแสดงออก C1 แสดงสัณฐานวิทยาที่มีความหนืดต่ำในวัฒนธรรมที่จมอยู่ใต้น้ำทำให้สามารถใช้สื่อการเจริญเติบโตและการผลิตที่ซับซ้อนได้

 

ไวรัส -infected เซลล์บาคูโลไวรัส - เซลล์แมลงที่ติดเชื้อ( Sf9 , Sf21 , สายพันธุ์High Five ) หรือเซลล์ของสัตว์เลี้ยงลูกด้วยนม ( HeLa , HEK 293 ) อนุญาตให้ผลิตโปรตีนไกลโคซิลหรือเมมเบรนที่ไม่สามารถผลิตได้โดยใช้ระบบเชื้อราหรือแบคทีเรีย มีประโยชน์สำหรับการผลิตโปรตีนในปริมาณสูง ยีนจะไม่แสดงออกอย่างต่อเนื่องเนื่องจากในที่สุดเซลล์โฮสต์ที่ติดเชื้อก็จะเหี่ยวและตายในแต่ละรอบการติดเชื้อ

การแสดงออกของเซลล์แมลงที่ไม่เป็น lytic การแสดงออกของเซลล์แมลงที่ไม่ไลติคเป็นอีกทางเลือกหนึ่งของระบบการแสดงออกของไลติกบาคูโลไวรัส ในการแสดงออกที่ไม่ใช่ lytic เวกเตอร์จะ transiently หรือเสถียรtransfectedเข้าไปในโครโมโซมของเซลล์แมลงสำหรับการแสดงออกของยีนที่ตามมาตามด้วยการคัดเลือกและคัดกรองรีคอมบิแนนท์โคลนนิ่ง [24]ระบบ non-lytic ถูกนำมาใช้เพื่อให้ผลผลิตโปรตีนที่สูงขึ้นและการแสดงออกของยีนรีคอมบิแนนต์เร็วขึ้นเมื่อเทียบกับการแสดงออกของเซลล์ที่ติดเชื้อบาคูโลไวรัส สายเซลล์ที่ใช้สำหรับระบบนี้ ได้แก่Sf9 , Sf21จากเซลล์Spodoptera frugiperda , Hi-5จากTrichoplusia niเซลล์และSchneider 2 เซลล์และ Schneider 3 เซลล์จากDrosophila melanogaster cells ด้วยระบบนี้เซลล์จะไม่เล็ดลอดออกไปและสามารถใช้โหมดการเพาะปลูกหลายโหมดได้ นอกจากนี้การผลิตโปรตีนสามารถทำซ้ำได้ระบบนี้ให้ผลิตภัณฑ์ที่เป็นเนื้อเดียวกันข้อเสียเปรียบของระบบนี้คือความต้องการของขั้นตอนการตรวจคัดกรองเพิ่มเติมสำหรับการเลือกที่ทำงานได้โคลน ระบบการแสดงออกของ Leishmania tarentolae (ไม่สามารถติดเชื้อในสัตว์เลี้ยงลูกด้วยนม) ช่วยให้สามารถผลิตโปรตีนได้อย่างคงที่และยั่งยืนโดยให้ผลผลิตสูงในอาหารที่กำหนดทางเคมี โปรตีนที่ผลิตได้แสดงการดัดแปลงหลังการแปลแบบยูคาริโอตอย่างเต็มที่รวมถึงการสร้างไกลโคซิเลชันและการสร้างพันธะไดซัลไฟด์



ผู้ตั้งกระทู้ หมวย (bamkannika003132-at-gmail-dot-com) :: วันที่ลงประกาศ 2020-10-27 12:52:47 IP : 49.228.21.219


แสดงความคิดเห็น
ความคิดเห็น *
ผู้แสดงความคิดเห็น  *
อีเมล 
ไม่ต้องการให้แสดงอีเมล



Copyright © 2010 All Rights Reserved.